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全自動(dòng)血凝儀檢測(cè)原理及臨床應(yīng)用
瀏覽次數(shù):956次 發(fā)布日期:2017-8-24 3:39:41

隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)的發(fā)展,及時(shí)診斷出血、血栓性疾病,觀察療效,分析抗凝藥物劑量等顯得越來(lái)越迫切,而傳統(tǒng)的手工方法和單一的凝固定性檢查已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足臨床要求,全自動(dòng)血凝儀的出現(xiàn)和應(yīng)用,使得止血和血栓項(xiàng)目檢查變得簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、可靠、極大地滿足了臨床診療的需要。
1 檢測(cè)的基本方法
目前血凝儀大多采用生物學(xué)方法,可分成三類:電流法、粘度法、光學(xué)法。
1.1
電流法:該法是利用血漿標(biāo)本纖維蛋白具有的導(dǎo)電性,將電極插入標(biāo)本中,利用兩電極之間的電流的通、斷來(lái)判斷纖維蛋白是否形成,依此確定凝固終點(diǎn)。
1.2
粘度法:又稱磁珠法,儀器的檢測(cè)部分有獨(dú)立的線圈產(chǎn)生所需的電磁場(chǎng),檢測(cè)時(shí)在待測(cè)標(biāo)本中加入小磁珠,利用變化的磁場(chǎng)使小磁珠產(chǎn)生運(yùn)動(dòng),隨著血漿的凝固,血漿的粘稠度征集增加,小磁珠擺幅逐漸減少,儀器內(nèi)的電磁傳感器,測(cè)定小磁珠的不同震蕩幅度,計(jì)算出血漿的凝固時(shí)間。
1.3
光學(xué)法:該法是目前血凝儀使用最多的一種檢測(cè)方法。當(dāng)血漿在樣品杯中逐漸凝固時(shí),纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白,其理學(xué)性狀也隨著變化;當(dāng)一束光通過(guò)樣品杯時(shí),其透射光和散光的強(qiáng)度也會(huì)隨之變化。
2 檢測(cè)的基本原理

比濁法以血漿中的被檢測(cè)物質(zhì)作為抗原,抗原與試劑中的抗體混合時(shí)會(huì)發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng),產(chǎn)生復(fù)合物顆粒,依此來(lái)測(cè)定被檢測(cè)物質(zhì)含量。其原理是:抗原量同抗體特異性結(jié)合反應(yīng)達(dá)到某一程度與所需的時(shí)間之間存在一定的數(shù)量關(guān)系,在檢測(cè)過(guò)程中,隨著待檢物質(zhì)與相應(yīng)抗體結(jié)合,其復(fù)合物顆粒增多單色光通過(guò)時(shí),透過(guò)的或反射的光強(qiáng)度就會(huì)發(fā)生一定的變化,儀器的電路部分自動(dòng)算出單位時(shí)間內(nèi)吸光度的變化量,再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線推算出待檢
物質(zhì)的含量。

使用光學(xué)法檢測(cè)時(shí),一般是將預(yù)溫好的血漿標(biāo)本和試劑快速混合,在混合瞬間吸光度非常弱,隨著樣品和試劑混合物中的纖維蛋白凝塊的形成,反應(yīng)杯內(nèi)標(biāo)本吸光度逐漸增強(qiáng),當(dāng)標(biāo)本凝固完全后,吸光度值就穩(wěn)定下來(lái);儀器在血漿和試劑混合的瞬間,也就是吸光度最弱時(shí),設(shè)定吸光度值A(chǔ)=0%,在血漿和樣品凝固完全后,吸光度最強(qiáng)時(shí),設(shè)定吸光度值A(chǔ)=100%;在0%-100%吸光度變化之間,儀器檢測(cè)通道單位時(shí)間內(nèi)分別采集多個(gè)數(shù)據(jù),這樣吸光度的變化值可做出一條曲線,儀器根據(jù)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目需要自動(dòng)選取曲線上的一個(gè)點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的時(shí)間為凝血時(shí)間;儀器內(nèi)的計(jì)算電路對(duì)做出的曲線求二次微分,二次微分為零的點(diǎn),就是凝固終點(diǎn);因?yàn)槟且粋€(gè)酶促的加速過(guò)程,到凝固終點(diǎn)時(shí),反應(yīng)速度和加速度都達(dá)到最大,此時(shí)凝固曲線的二次微分為零。

儀器在測(cè)定待測(cè)血漿樣品前,必須首先定標(biāo),也是對(duì)已知濃度或活性的標(biāo)準(zhǔn)品的凝血時(shí)間宋制定標(biāo)準(zhǔn)曲線;在檢測(cè)待測(cè)樣品時(shí),計(jì)算電路首先檢測(cè)出血漿的凝固時(shí)間,在根據(jù)凝固時(shí)間從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求出濃度或活性。
3 儀器的檢測(cè)項(xiàng)目和臨床應(yīng)用
儀器的檢測(cè)項(xiàng)目一般都有十幾種,用戶可根據(jù)臨床需要和試劑情況選擇檢測(cè)項(xiàng)目。

其中:凝血實(shí)驗(yàn)主要是針對(duì)人體內(nèi)抗酶系統(tǒng)和纖溶系統(tǒng)中的酶、酶原和一些因子的測(cè)定,常檢項(xiàng)目有:(1)TT-凝血酶時(shí)間;(2)PT-凝血酶原時(shí)間;(3)APPF-部分凝血活酶時(shí)間;(4)FIB-纖維蛋白。

除此,還可測(cè)定下列參數(shù):(1)凝血因子分析(Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ);(2)α-2-抗胞漿素;(3)肝素抗-Xa;(4)蛋白C及活性蛋白C;(5)狼瘡抗凝物;(6)蛋白C和S抗凝物等等。

當(dāng)病人發(fā)生DIC、原發(fā)性纖溶癥、維生素K缺乏癥、肝臟疾病或血液循環(huán)中有抗凝物質(zhì)時(shí),凝血酶原時(shí)間(PT)都會(huì)延長(zhǎng);若PT縮短則常見于凝血因子V增多癥、高凝狀態(tài)和血栓性疾病等。當(dāng)病人有肝臟疾病、阻塞性黃疸、新生兒出血癥、腸道滅菌綜合征、吸收不良綜合征等某種疾病時(shí),活化部分凝血酶時(shí)間(APTT)會(huì)延長(zhǎng);APTT參數(shù)是反映血漿中凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ水平的實(shí)驗(yàn),是外源性凝血系統(tǒng)的篩選實(shí)驗(yàn);當(dāng)血漿中這幾種因子某種減少時(shí),APTT參數(shù)也延長(zhǎng),可進(jìn)一步檢查凝血因子,若Ⅷ因子缺乏可能是甲型血友病、Ⅸ因子缺乏一般是乙型血友病。而APIT減少,一般是血栓性病癥,如心肌或肺梗死、腦血管病變等或是促凝物質(zhì)進(jìn)入血液及凝血因子活性增高。當(dāng)纖維蛋白原濃度(FIB)大于4.5g/L時(shí):常見于糖尿病酸中毒、尿毒癥、急性腎炎、休克、急性感染和惡性腫瘤及外科大手術(shù)等。FIB參數(shù)小于1.7g/L時(shí),多見于彌漫性血管內(nèi)凝血和原發(fā)性纖溶癥、重癥肝炎和肝硬化等;FIB參數(shù)也用一起監(jiān)測(cè)防檢和溶栓治療。總之,在醫(yī)學(xué)各科對(duì)疾病的研究、診斷和治療方面,凝血分析的各個(gè)參數(shù)均有其不同的重要意義。

來(lái)源:中國(guó)醫(yī)療器械信息網(wǎng)